人成熟促進(jìn)因子(MPF)免疫組化試劑盒?實(shí)驗步驟

人成熟促進(jìn)因子(MPF)免疫組化試劑盒實(shí)驗步驟：

1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于60℃恒溫烤箱中至少烤1 hr；

2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10 min；

3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無(wú)水乙醇5min，95%乙醇2 次（每次2min），85%乙醇2 min；75%乙醇2min，自來(lái)水沖洗，ddH2O 洗2×2min；

4.抗原修復： 根據抗體說(shuō)明書(shū)推薦方法進(jìn)行抗原修復，常采用高壓、微波（溫

度達到98~100℃）或酶消化修復法，室溫自然冷卻，自來(lái)水沖洗，ddH2O 洗2×2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復方法見(jiàn)附1）* 注：有些抗原勿需修復，直接進(jìn)入第5 步封閉。

5.封閉： 滴加試劑B，37℃濕盒孵育30 min；

6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗），37℃濕盒孵育2 hr 或4℃過(guò)夜；

7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；

8.封閉： 滴加試劑B，37℃濕盒孵育10 min；

9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑D），37℃濕盒中孵育30 min；

10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；

11.封閉： 滴加試劑Tween 20，37℃濕盒孵育封閉20 min；

12.加HRP-SA： 滴加用抗體稀釋液稀釋的試劑E（1：50~200，終濃度5~20 nM），

37℃濕盒中孵育30 min；

13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）；

14.顯色：應用DAB 溶液（試劑F）顯色；

15.復染：自來(lái)水充分沖洗，復染，脫水，透明；

16.封片： 待組織標本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；

17.觀(guān)察成像： 顯微鏡下觀(guān)察成像。

磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體

磷酸化活化復制因子2抗體

磷酸化活化復制因子2抗體

磷酸化細胞周期末期促進(jìn)復合蛋白APC1抗體

發(fā)育分化增強因子1抗體

磷酸化發(fā)育分化增強因子1抗體

蛋白激酶B3

肌動(dòng)蛋白結合蛋白Girdin抗體

蛋白激酶A2抗體

血管緊張素Ⅱ受體2抗體

ASH1蛋白抗體

芳香乙酰胺脫乙?；笜拥鞍?抗體

血管內皮細胞遷移蛋白抗體

醛糖還原酶相關(guān)蛋白質(zhì)抗體

膽汁酸結合蛋白DDH2抗體

血管生成素樣蛋白3抗體

甘油酯激酶線(xiàn)粒體抗體

磷酸化內收蛋白a1抗體

自噬體ATG16L2蛋白抗體

酸性磷酸酶抗體

酸性磷酸酶抗體

極光激酶A相互作用蛋白1抗體

載脂蛋白樣蛋白6抗體